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ELISA 4PL Curve Fitter

ELISA 검량선 4파라미터 로지스틱 회귀

y = d + (a - d) / (1 + (x / c)^b)

STANDARD CURVE DATA

#Concentration (e.g., pg/mL)OD
1
2
3
4
5
6

≥ 4 points with conc > 0 required. Concentration = 0 (background) is ignored during the fit.

4PL FIT

a (top)

3000.392

b (slope)

-535.445

c (EC50)

1.062e+5

d (bottom)

0.862

R²

-0.0430

LLOQ

1.06e+5

ULOQ

1.07e+5

10^110^210^30.11787.681575.262362.843150.41Concentration (log scale)OD

Back-calculate Unknown Sample

→ conc =— (out of range)

도구 가이드

정의

ELISA 4PL 검량선 피팅 도구 — 4-parameter logistic (4PL) sigmoidal 모델 y = d + (a-d)/(1+(x/c)^b)을 표준 OD 데이터에 비선형 회귀(Levenberg-Marquardt 자체 구현)로 피팅합니다. a=상단 plateau, d=하단 plateau, c=EC50, b=Hill slope. 미지 샘플 OD → 농도 역산.

목적

(1) ELISA 검량선 피팅 (선형 회귀보다 정확) — GraphPad Prism 4PL 대체 (2) LLOQ/ULOQ (정량 하한/상한) 자동 계산 (3) 미지 샘플 OD → 농도 역산 (CV% 표시) (4) Cytokine, hormone, antibody 정량 등 sigmoidal dose-response 일반

사용법

① 표준 데이터 입력 (concentration, OD pair). 보통 6~8점 (예: 0, 7.8, 31.25, 125, 500, 2000 pg/mL). ② "Fit 4PL" 클릭 → LM 최적화로 a, b, c, d 산출 ③ 자동 출력: • 4PL 파라미터 + R² (적합도) • LLOQ ≈ 가장 낮은 정량 가능 농도, ULOQ ≈ 상단 plateau 95% 농도 • Curve plot (semi-log x) ④ 미지 샘플 OD 입력 → 농도 역산 outlier(잔차 >3σ) 자동 경고. 데이터 ≥4점 필수.

예시

예) IL-6 ELISA 표준곡선 Standards: 0, 7.8, 31.25, 125, 500, 2000 pg/mL OD values: 0.05, 0.12, 0.35, 0.80, 1.50, 2.40 → 4PL fit: a=2.60, b=1.05, c=180, d=0.04, R² = 0.998 → LLOQ ≈ 8 pg/mL, ULOQ ≈ 1800 pg/mL 미지 샘플 OD = 0.65 → c = 78 pg/mL